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Funktionelle und molekulare Charakterisierung humaner periostaler Zellen des Mastoids für das in-situ Tissue Engineering
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Published: | April 24, 2006 |
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Ziel dieser Studie war die Charakterisierung des funktionellen und molekularen Profils periostaler Zellen (PC) in Hinblick auf eine Eignung im Bereich zukünftiger Zelltherapien wie dem in-situ Tissue Engineering.
Zunächst wurden humane PC des Mastoids in Medium mit humanem Serum in Kultur gebracht. Während der Proliferationsphase wurden mittels FACS für mesenchymale Stammzellen (MSC) spezifische Oberflächenantigene bestimmt. Durch Real-time PCR und Immunohistochemie wurde das Expressionsprofil von Chemokinrezeptoren analysiert. Der chemotaktische Effekt von SDF-1 auf PC wurde dann in einem 96-transwell assay gemessen. Osteogene, chondrogene und adipogene Differenzierung wurden nach Standadtprotokollen induziert. Darüberhinaus wurden PC in Fibrin und PGLA dreidimensional eingebettet und unter osteogenen Bedingungen kultiviert. Die RNA der undifferentierten PC und der 3D Knochentranplantate wurde isoliert und jeweils durch einen genome-wide microarray analysiert.
Die Morphologie und die Expansionskapazität der PC zeigten ein für MSC typisches Verhalten, die FACS-Analyse zeigte ein MSC ähnliches Expressionsmuster von SH-2+, CD73+, ALCAM+, CD44+, CD14-, CD34- Antigenen. Wie MSC exprimierten auch PC einige Chemokinrezeptoren und zeigten eine dosisabhängigen chemotaktischen Effekt von SDF-1. Durch Microarrays konnten die Expressionsprofile undiffentierter PC und von PC nach osteogener 3D-Kultur erstellt werden.
Die Ergebnisse untermauern die Hypothese, dass PC einen MSC ähnlichen Charakter haben. Sie besitzen das Potential in verschiedene Zelllinien zu differenzieren und nach Stimulation zu migrieren. Daher scheinen sie auch für das in-situ Tissue-Engineering, z.B. zur Behandlung von Knochendefekten geeignet zu sein.