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Induktionsprofil der Vascular endothelial growth factor-Isoformen in humanen retinalen Pigmentepithelzellen nach Behandlung mit Lipidperoxidationsprodukten
VEGF isoforms are differentially induced by lipidperoxidation products in human retinal pigment epithelial cells
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Autoren
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T. U. Krohne
- Universitäts-Augenklinik, Bonn
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M. Bergmann
- Pathologisches Institut, Universität Heidelberg
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F. G. Holz
- Universitäts-Augenklinik, Bonn
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J. Kopitz
- Pathologisches Institut, Universität Heidelberg
| Veröffentlicht: | 18. September 2006 |
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Gliederung
Text
Ziel
Lipidperoxidationsprodukte wie 4-Hydroxynonenal (HNE) und Malondialdehyde (MDA) verursachen in retinalen Pigmentepithelzellen (RPE) sowohl eine Hemmung der lysosomalen Funktion als auch eine Induktion von Vascular endothelial growth factor (VEGF), zwei Schlüsselereignisse in der Pathogenese der altersabhängigen Makuladegeneration (AMD). Als Hinweis auf die Bedeutung der verschiedenen VEGF-Isoformen im Rahmen der AMD haben wir ihre Induktion in HNE- und MDA-behandelten RPE-Zellen quantifiziert.
Methode
Primäre humane RPE-Zellen aus Hornhautspenderaugen wurden mit 1µM HNE oder MDA inkubiert. Nach 6h erfolgte die Extraktion der zelluläre mRNA für die weitere Analyse durch quantitative Real-time RT-PCR unter Verwendung von SYBR green. Die mRNA der VEGF-Isoformen VEGF121, VEGF165, VEGF189 und VEGF206 wurden mittels spezifischer Primer nachgewiesen. Beta-Actin diente als Ladungskontrolle.
Ergebnisse
Unbehandelte primäre RPE-Zellen zeigten eine mRNA-Expression von VEGF121, VEGF165 und VEGF189, während sich eine Expression von VEGF206 nicht nachweisen ließ. Behandlung mit sowohl HNE als auch MDA führte zu einer deutlichen Induktion aller 3 exprimierten VEGF-Isoformen. Die quantitative Auswertung der mRNA-Konzentrationen ergab den höchsten Anstieg für VEGF121, gefolgt von VEGF165 und VEGF189.
Schlussfolgerungen
Neben ihrem inhibitorischen Effekt auf die lysosomale Funktion führen Lipidperoxidationsprodukte auch zu einer Induktion der VEGF-Isoformen VEGF121, VEGF165 und VEGF189 in humanen RPE-Zellen. Diese Ergebnisse unterstützen eine mögliche Rolle von Lipidperoxidationsprodukten in der Pathogenese sowohl der Früh- als auch der Spätstadien der AMD und geben einen Hinweis auf die Bedeutung der verschiedenen VEGF-Isoformen für diese Erkrankung.
