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Isolation und Differenzierung von Stammzellen aus dem Corti’schen Organ
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Veröffentlicht: | 24. April 2007 |
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Einleitung: Das fehlende Regenerationsvermögen der adulten Cochlea ist eine der Hauptursachen für chronische Innenohrschwerhörigkeit. Fehlende Regeneration wird insbesondere auf den Verlust des Proliferationsvermögens während der Entwicklung zurückgeführt. Aus der postnatalen Cochlea lassen sich Stammzellen isolieren, die als Zellsphären kultiviert werden können (Oshima et al, 2006). Ziel der Untersuchung ist die Optimierung der Bedingungen zur Isolation von Stammzellen und deren anschließende Differenzierung zu Stützzellen und Haarzellen
Methoden: Zur Isolation von Stammzellen wurde das Corti’sche Organ, verschiedener postnataler Entwicklungsstadien der Maus präpariert. Anschließend erfolgte die enzymatische Dissoziation in Einzelzellen und die Suspensionskultur zur Bildung von Stammzellsphären. Die gebildeten Sphären wurden in Adhäsionskultur ausdifferenziert. Es erfolgte der Nachweis von Markerproteinen für Stützzellen und Haarzellen.
Ergebnisse: Aus dem postnatalen Corti’schen Organ lassen sich Zellen isolieren, die zu Stammzellsphären auswachsen. Diese Sphären lassen sich über mehrere Passagen propagieren. In einem Teil der Zellen in den Spären lassen sich Stammzellmarkern (Nestin) und Proliferationsmarkern (BrdU) nachweisen. Nach Überführung in Adhäsionskultur lassen sich Markerproteine für Stützzellen (p27, GFAP) und Haarzellen (Myosin VIIa) nachweisen.
Schlussfolgerungen: Aus dem Corti’schen Organ des postnatalen Innenohres lassen sich Zellen isolieren, die zu Stammzellsphären auswachsen und sich anschließend differenzieren lassen. Diese Beobachtungen deuten auf ein endogenes Potential zur Regeneration im Corti’schen Organ hin.
Unterstützt durch: BMBF BioProfile 0313612A