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Fragestellung: Die Expression von PD-L1 auf Tumorzellen stellt die Rationale für den Einsatz von Checkpointinhibitoren dar. In diversen Tumorentitäten exprimieren auch von Tumorzellen abgegebene extrazelluläre Vesikel (EVs) PD-L1 und können immuninhibitorisch wirken. Beim Urothelkarzinom (UCC) liegen hierzu jedoch keine Daten vor.

Material und Methoden: EVs wurden mittels Ultrazentrifugation aus fünf muskelinvasiven, zwei nicht-muskelinvasiven UCC-Zelllinien und einer gesunden Urothel-Zelllinie isoliert. Die Zelllinien wurden vorher einer repetitiven Stimulation mit Interferon-Gamma (IFNg) unterzogen. Für die Isolation von EVs aus Tumorgewebeproben wurde zusätzlich ein Saccharose-Gradient verwendet. Der Nachweis von EVs erfolgte durch Western Blotting, Nano Tracking Analyse und Elektronenmikroskopie. Die PD-L1 Expression auf Zellen und EVs wurde mittels Western Blot semiquantitativ bestimmt.

Ergebnisse: Die basale zelluläre PD-L1 Expression in den UCC-Zelllinien war niedrig, in nicht-muskelinvasiven Zelllinien teils nicht detektierbar. IFNg-Stimulation führte in allen acht Zelllinien zu einer Hochregulation der PD-L1 Expression, die Intensität der PD-L1-Anreicherung war allerdings zelllinienspezifisch. Auch in den EVs der UCC-Zelllinien war PD-L1 nachweisbar, teilweise nach Stimulation verstärkt. Zwischen muskelinvasiven und nicht-muskelinvasiven Zelllinien bestand signifikanter Unterschied. Aus Tumorgeweben konnten EVs erfolgreich isoliert werden, diese waren auch PD-L1 positiv.

Schlussfolgerungen: Erstmals konnte im Urothelkarzinom PD-L1 auf Extrazellulären Vesikeln sowohl von Zelllinien als auch aus Gewebeproben nachgewiesen werden. EVs könnten somit eine neue Klasse an Biomarkern darstellen, die die PD-L1-Expression der Tumorgewebe widerspiegeln. Darüber hinaus ermöglicht das hier etablierte Modell die weiterführende Analyse der Rolle PD-L1-positiver EVs im Tumormikromilieu sowohl des muskelinvasiven als auch nicht-muskelinvasiven Urothelkarzinoms.