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Einleitung: Proteinase-aktivierter Rezeptor-1 (PAR1), der vom F2R-Gen kodiert wird, gehört zu einer Unterfamilie der G-Protein-gekoppelten Rezeptoren. PARs werden durch Serinproteasen wie Thrombin durch Spaltung eines Teils ihrer extrazellulären Domäne aktiviert. Die weite Verbreitung von PARs in einer Vielzahl von Zellen stützt die Idee, dass sie an vielen Prozessen beteiligt sind, einschließlich Koagulation, Zellproliferation und Zelladhäsion. PAR1-Mutationen wurden bei verschiedenen Krebsarten beobachtet, einschließlich Blasenkrebs (BC), was auf eine Rolle von PAR1 bei der Tumorentstehung hinweist.

Methode: Die F2R/PAR1-Expression wurde durch RT-qPCR und Western Blot in primären menschlichen Urothelzellen, immortalisierten Urothelzellstämmen (z. B. UROtsa und HBLAK) und BC-Zelllinien (RT4, UMUC3 und T24) bestimmt. Eine stabile ektopische PAR1-Expression wurde verwendet, um die Rolle von PAR1 in BC-Zellen (UMUC3 und T24) aufzuklären. MTT-Assay, Boyden-Kammer-Assay und Scratch-Assay-Experimente wurden für funktionelle Experimente verwendet.

Ergebnisse: PAR1 ist in immortalisierten Y235T- und HBLAK-Zellen, die aus normalen Urothelzellen hergestellt wurden, leicht nachweisbar, während seine Expression in den Blasenkrebszelllinien RT4, T24, UMUC3 geringer war. Die Überexpression von PAR1 inhibierte die Proliferation, Migration und Invasion von T24-Zellen und beeinträchtigte die Proliferation und Invasion von UMUC3-Zellen. Auf molekularer Ebene führte die ektopische PAR1-Expression in beiden Zelllinien zu erhöhten LATS1- und p-YAP-Spiegeln. Interessanterweise reduzierte die PAR1-Expression die PTEN-Expression und führte zu erhöhten Spiegeln von p-AKTSer473, p-AKTThr308 in T24-Zellen. Umgekehrt führte die Expression von PAR1 zu reduzierten p-AKTSer473, p-AKTThr308 Spiegeln in PTEN-Null-UMUC3-Zellen.

Schlussfolgerung: Diese Studie zeigt zum ersten Mal eine mögliche Rolle von PAR1 in BC und zeigt, dass PAR1 die Proliferation, Migration und Invasion von BC-Zellen über AKT- und Hippo-YAP-Signalwege beeinträchtigen kann. Weitere Studien sind erforderlich, um die molekularen Wege zu klären, die die Proliferation, Invasion und Migration von BC-Zellen als Reaktion auf die PAR1-Expression regulieren. Es bleibt auch unklar, ob die PAR1-induzierte widersprüchliche AKT-Phosphorylierung, die zu T24- und UMUC3-Zellen führt, auf die PTEN-Expression in diesen Zellen zurückzuführen ist.