Article
Modulation der Aktivität neuronaler Stammzellen des Nucleus Cochlearis der Ratte durch niedermolekulare Glycogen-Synthase-Kinase-Inhibitoren
Search Medline for
Authors
Published: | April 14, 2014 |
---|
Outline
Text
Einleitung: Glycogen-Synthase-Kinase-3β (GSK-3β), ein Modulator des Wnt-Signalweges, ist eine Schlüsselkomponente neuronaler Prozesse. Ihre Aktivität beeinflusst axonales Wachstum und deren synaptische Interaktionen sowie Zelltod und Zellüberleben. Über eine Steuerung der β-Catenin-Konzentration spielt sie eine fundamentale Rolle bei der Differenzierung neuronaler Stammzellen. Ziel dieser Arbeit war es, zu untersuchen welche Auswirkungen eine Modulation von GSK-3β auf die Differenzierung und die neuronale Aktivität maturierender Stammzellen des Nucleus Cochlearis (N.C.) hat.
Methoden: Neuronale Stammzellen wurden aus dem N.C. postnataler p9 Ratten isoliert und für 4 Wochen frei flottierend kultiviert. Einzelzellen dieser Kulturen wurden auf Deckgläser ausplattiert und für 8 Tage in Differenzierungsmedium kultiviert. Einem Teil dieser Kulturen wurde 10 µM SB-216763 (Sigma Aldrich), ein selektiver GSK-3-Inhibitor, zugesetzt. An Tag 1 und Tag 8 wurden jeweils Zellen mit dem Calciumindikator Fura-2 beladen und in einem Calcium-Imaging-Assay auf spontane neuronale Aktivität untersucht. Anschließend erfolgte die Fixierung der Kulturen und eine Immunfluoreszenzfärbung zur Identifikation neuronaler und Gliazell-Marker.
Ergebnis: Die selektive Inhibition der GSK-3 in neuronalen Stammzellkulturen des N.C. führte zu einer erhöhten neuronalen Spontanaktivität nach einer Differenzierung über 8 Tage. Des Weiteren fand sich in diesen Kulturen eine signifikant erhöhte Anzahl an Neuronen.
Diskussion: Die vorliegenden Ergebnisse zeigen, dass der GSK-3β-Signalweg eine essentielle Rolle bei der Differenzierung und der neuronalen Aktivität des N.C. spielt. Die gewonnenen Erkenntnisse könnten künftig bei der Therapie von Erkrankungen der Hörbahn zum Tragen kommen.
Der Erstautor gibt keinen Interessenkonflikt an.