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Podosomale Strukturen als Orte der Zell-Matrix-Interaktion in humanen kornealen Epithelzellen
Cell-matrix interaction in podosomal structures of human corneal epithelial cells
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Published: | September 18, 2006 |
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Ziel
Defekte in der Zell-Matrix-Interaktion in humanen kornelaen Epithelzellen können zu rezidivierenden Erosionen, dystrophischen Hornhauterkrankungen oder einer verlangsamten Heilung der Oberfläche führen. Wir konnten zeigen, dass primäre humane korneale Epithelzellen podosomale Strukturen ausbilden. Diese Adhäsionsstrukturen werden als Vorläufer von Hemidesmosomen angesehen. Ziel war es, ihre mögliche Rolle in der Zell-Matrix-Interaktion zu untersuchen.
Methode
Humane korneale Epithelzellen einer immortalisierten Zelllinie oder aus Auswuchskulturen von Hornhaut-Spenderringen wurden auf Fibronectin-beschichteten Glasobjektträgern ausgesät. Die Zellen wurden mit Kontrollmedium oder Phorbol-12,13-dibutyrate (PDBu) stimuliert, fixiert, mit Phalloidin-TRITC bzw. Antikröpern gegen Cortactin und Vinculin gefärbt. Die Lokalisation der Proteine wurde durch konfokale Lasermikroskopie untersucht. Zur Darstellung von Matrix-Interaktionen wurde Fluoreszenz-markiertes Fibronektin als Beschichtung verwendet.
Ergebnisse
In primären kornealen Epithelzellen und einer cornealen Epithelzelllinie liessen sich podosomale Strukturen immunhistochemisch nachweisen. Nach PDBu-Stimulation nahm deren Anzahl markant zu. Fibronektin wird im Bereich podosomaler Strukturen abgebaut und an Focal Adhesions angereichert.
Schlussfolgerungen
Podosomale Strukturen können auch an kornealen Epithelzellinien untersucht werden. Die Resorption extrazellulärer Matrix im Bereich podosomaler Strukturen spricht für deren mögliche Rolle in der Adhäsion und -migration von kornealen Epithelzellen.