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Diagnostik humaner Perilymphe
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Veröffentlicht: | 26. März 2015 |
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Einleitung: Bisher existieren nur in begrenztem Ausmaß Möglichkeiten einer genauen Diagnostik der Erkrankungen des Innenohres, die zu einer Innenohrschwerhörigkeit führen. Das Ziel dieses Projekts ist, die humane Perilymphe biochemisch zu analysieren, um ihre Zusammensetzung zu untersuchen. Weiterhin sollen perilymphspezifische Marker identifiziert werden, die mit Innenohrerkrankungen korrelieren, um Ursachen und Mechanismen unterschiedlicher Innenohrerkrankungen diagnostizieren zu können.
Methoden: Humane Perilymphe-Proben können intraoperativ bei Cochlea Implantationen (CI) entnommen werden. Der Proteingehalt der Proben wird über den Protein dotMETRIC Assay (G-Biosciences) bestimmt. Die Proteine der Perilymphe werden durch Massenspektrometrie gekoppelt mit Flüssigkeitschromatographie identifiziert. Parallel dazu wird die Raman-Spektroskopie (RS) eingesetzt, um die Perilymphe-Proben zunächst ex vivo und später in vivo und nicht-invasiv untersuchen zu können.
Ergebnisse: Bisher wurde bei 41 Patienten mit einer eigens entwickelten Methode Perilymphe entnommen. Es konnten Probenvolumina von 2-10 µl erzielt werden, wobei das durchschnittliche Volumen der Proben 3 µl beträgt. Es konnten pro Probe durchschnittlich 300 Proteine und insgesamt mehr als 1000 unterschiedliche Proteine identifiziert werden. Erste Ergebnisse der RS belegen, dass einzelne Peptide anhand ihres Spektrums differenzierbar sind und die Charakterisierung von Proteingemischen aussichtsreich ist.
Schlussfolgerungen: Die identifizierten Perilymphe-Proteine müssen anhand von Literatur- und Datenbankrecherchen und in Bezug zu den Patientendaten (z.B. Krankheitsursache, Alter, Genetik) weiterhin genau untersucht werden, um diese Proteine hinsichtlich ihrer Bedeutung für das Innenohr detailliert zu charakterisieren.
Unterstützt durch: Gefördert durch das DFG Exzellenzcluster Hearing4All.
Der Erstautor gibt keinen Interessenkonflikt an.