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Einfluss des Zellfarbstoffs DiI auf Proliferation, Migration und Differenzierungspotential von humanen Fettstammzellen
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Veröffentlicht: | 4. April 2012 |
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Einleitung: Adulte mesenchymale Stammzellen aus Fettgewebe (ASC) werden als Zellquelle für das experimentelle Tissue Engineering in vitro und in vivo eingesetzt. Die Markierung von ASC mit dem Carbocyan-Zellfarbstoff DiI erlaubt deren Identifizierung in einem Konstrukt bis zur Ernte. Darüber hinaus können in vivo markierte, implantierte ASC von ortsansässigen Zellen unterschieden werden. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, den Einfluss von DiI auf die Proliferation, Migration und Differenzierung von humanen ASC darzustellen.
Methoden: ASC wurden aus Liposuktionsmaterial von 10 Patienten isoliert, expandiert und mit DiI markiert. Das Multidifferenzierungspotential wurde an markierten und nicht-markierten Zellen durch adipogene, osteogene und chondrogene Induktion untersucht. Die Analyse erfolgte histologisch und mit der PCR. Die Migration wurde im Scratch-Assay und im Transwell-System untersucht, die Proliferation durch Zellzählung über einen Zeitraum von 10 Tagen überprüft. Darüber hinaus wurde die Stabilität der Zellfärbung über einen Zeitraum von 30 Tagen dokumentiert.
Ergebnisse: Die Markierung mit DiI zeigte keinen Einfluss auf Differenzierungspotential, Migration und Proliferation der Zellen. Die Intensität der Zellfärbung und die Anzahl der markierten Zellen nehmen im Verlauf der Proliferation und mit der Anzahl der Passagen ab.
Schlussfolgerung: Funktionseinschränkende Einflüsse des Fluoreszenzfarbstoffes bei einer Anwendung im Tiermodell sind nicht zu erwarten. Die Markierung von ASC mit DiI hat keinen Einfluss auf die Physiologie und Funktion der Zellen.
Unterstützt durch: IZKF Würzburg