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Multiplexe Phänotypisierung von peripheren Blutleukozyten (PBL's) mittels Objektträger-basierter Zytometrie (SBC) - ein Werkzeug der Cytome-basierten Prädiktiven Medizin
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Veröffentlicht: | 24. April 2006 |
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Einleitung: Virchow’s „Cellularpathologie“ ist die Grundlage heutiger zellbasierter Analyseverfahren. Sie haben spezielle Bedeutung für die prädiktive Medizin, um Veränderungen auf zellulärer Ebene vor deren Manifestation im Krankheitsverlauf erkennen zu können.
Standard hierfür ist das Flow Zytometer(FCM), mit dem aber wiederholte Untersuchungen an ein und derselben Zelle nicht durchgeführt werden können. Dies ist dagegen die Stärke der SBC.
Material & Methoden: Um die SBC für die prädiktive Medizin zu evaluieren, haben wir an 30 Patienten mit Kopf-Hals-Karzinomen mehrere Studien durchgeführt: PBL's wurden mittels Fluoreszenz gefärbt, mit dem FCM und dem Laser Scanning Zytometer(LSC) auf unterschiedlichen Trägern(beschichtete und unbeschichtete Objektträger, Neubauer-Zählkammer, Chamber-Slides) analysiert.
Ergebnisse: Die SBC ist für das Konzept der prädiktiven Medizin geeignet: das LSC ist im Vergleich verschiedener Trigger(FSC r=0,88-0,96;CD45-FITC r=0,90-0,97;7AAD r=0,97-0,99), in der Analyse von Spherobeads, der Berechnung von Regressionskoeffizient(r=0,9987) und Resolutionsparameter bei der Analyse von PBL's äquivalent zum FCM. Es erlaubt eine absolute Zellzahlbestimmung(r=0,9751) ohne zusätzliche Aufrüstungen oder teure Zählpartikel. Das LSC ist in den Grundfunktionen dem FCM partiell sogar überlegen: sofortige morphologische Analyse der Zellen, Nachfärbung, Re-Lokalisation auf Zell-zu-Zell-Basis und erneute Analyse sind möglich.
Schlußfolgerung: Die SBC birgt für die prädiktive Medizin viele Möglichkeiten und innovative Wege, um z.B. Hochrisikopatienten präoperativ zu erkennen, Non-Responder vor bestimmten Therapien zu identifizieren, alternative Therapien durchzuführen. Insgesamt könnten die Therapiekosten gesenkt werden.