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Hintergrund: Epithelzellen der Limbusregion (LEZ) von Aniridie-Patienten weisen im Gegensatz zu LEZ von Gesunden ein verändertes mRNA-Expressionsprofil auf. Um zu klären, ob diese Veränderungen durch die Reduktion des PAX6 Proteins hervorgerufen werden oder durch das Überwachsen mit Bindehaut und entzündlichen Prozessen beeinflusst werden, haben wir ein primäres Aniridie Zellmodell etabliert, um die Effekte von PAX6 auf Epithelzellen isoliert betrachten zu können.

Methoden: Aus Limbusbiopsien von Aniridie Patienten und Corneo-Skleralringen von Hornhautspendern wurden Limbusepithelzellen (LEZ) isoliert. mRNA Profile von LEZ von je zwei Aniridie Patienten und Kontrollen wurden bioinformatisch untersucht, um durch PAX6 regulierte Gene zu identifizieren. LEZ von Patienten und Kontrollen wurden mit siRNA gegen PAX6 transfiziert und für 48h und 72h inkubiert. Anschließend wurde eine RNA-Sequenzierung durchgeführt und mit quantitativer PCR die Faktoren DSG1, K12, PITX1, DKK1 und SPINK7 untersucht.

Ergebnisse: Aus der RNA-Sequenzierung wurden mithilfe der DAVID Datenbank (Visualization and Integrated Discovery) eine regulierte Gengruppe, welche in Aniridie reduziert sind, identifiziert. In den Patientenproben sowie im siRNA Zellmodell sind DSG1 und SPINK7 herunterreguliert. Die Marker DKK1, PITX1 und K12 zeigen im Zellmodell eine andere Regulation als in Patientenproben.

Schlussfolgerungen: Epithelzellen werden durch die Reduktion des PAX6 Proteins so verändert, dass sie einen Einfluss auf die Pathogenese bei der Aniridie Assoziierten Keratopathie (AAK) haben. Der Einfluss von PAX6 auf die Epithelzellen konnte im siRNA Modell direkt nachgewiesen werden, da eine Kontamination durch einen anderen Zelltyp ausgeschlossen ist. Es sind weitere Untersuchungen notwendig, um den Verlauf der AAK und den Einfluss von PAX6 zu untersuchen.