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Einleitung: Dem murinen postnatalen Cortischen Organ fehlt jegliches Potential zur Selbsterneuerung und Regeneration. Für pharmakologische Screenings, die zur Entwicklung einer rationalen Therapie des Haarzellverlusts benötigt werden, ist eine in vitro Kultur von Haarzellen unverzichtbar. In Stammzell-basierten Kulturen des Cortischen Organs können derzeit etwa 2% Haarzellen in vitro generiert werden. Für pharmakologische Screenings otoprotektiver/-regenerativer Substanzen wird eine größere Zellzahl benötigt.

Methoden: Stützzellen im Bereich der inneren Haarzelle exprimieren den Glutamat-Aspartat Transporter (GLAST; GLAST+ Zellen), Stützzellen nahe der äußeren Haarzellen den p75 Neurotrophin Rezeptor (p75-NTR+ Zellen). Diese Zellen wurden bei der Maus (P4) mit Hilfe von FACS und MACS isoliert. Die Proliferationsrate und das Potential zur Differenzierung in Haar- und Stützzellen wurde mittels Immunhistochemie und qRT-PCR bestimmt.

Ergebnisse: GLAST+, p75-NTR+ und GLAST-/p75-NTR- Zellen proliferieren in vitro (EdU-Inkorporation) und exprimieren Stammzell-Marker. GLAST+ und p75-NTR+ Zellen zeigen in vitro einen Trend zur vermehrten Generierung von Haar- und Stützzellen im Vergleich zu GLAST-/p75-NTR-Zellen, wie dieExpression Haarzell- und Stützzellmarker in vitro zeigt. Zugabe eines Notch-Signal Inhibitors in vitro erhöht die Anzahl neu gebildeter Haar- und Stützzellen signifikant.

Schlussfolgerung: Aufgereinigte Stützzellen proliferieren in vitro. GLAST+ und p75-NTR+ dienen in vitro als Vorläuferzellen für Haarzellen. Zugabe eines Notch-Signal Inhibitors induziert die Zelldifferenzierung zu Haar- und Stützzellen. Das entwickelte Verfahren verbindet FACS und MACS Aufreinigung von Zellen mit chemischer Induktion zur verbesserten in vitro Erzeugung von Haarzellen und Stützzellen des Cortischen Organs.

Der Erstautor gibt keinen Interessenkonflikt an.