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3-dimensionale Schwannzell-Neuronen-Sphäroide – Assay für Neuritenaussprossung und Myelinisierung
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Published: | September 27, 2011 |
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Einleitung: Die Neuritenaussprossung und Myelinisierung sind Qualitätskriterien der peripheren Nervenregeneration. Aufgrund der Komplexizität der physiologischen Vorgänge während der Nervenregeneration werden hauptsächlich in-vivo Versuche durchgeführt. Das Ziel der vorgestellten Studie war die Etablierung eines 3-dimensionalen in-vitro Modells zur Evaluation von Myelinisierung und Neuritenaussprossung.
Material und Methoden: Aus neonatalen Schwannzellen und der neuronalen Zellreihe NG108-15 wurden im hängenden Tropfen Sphäroide gebildet und in Kollagen eingebettet. Die 3-dimensionalen Sphäroide wurden über einen Zeitraum von 21 Tagen beobachtet. Die morphologischen Veränderungen wurden täglich fotodokumentiert und die Größenzunahme sowie Länge der Neuritenaussprossung gemessen. Zum Nachweis von Myeliniserung wurden immunhistochemische Färbungen auf Neurofilament und myelin-bindendes Protein (MBP) durchgeführt. Die 3-dimensionale Kultur wurde mit einer 2-dimensionalen Schwannzell-NG108-15 Kultur verglichen.
Ergebnisse: Im Gegensatz zur 2-dimensionalen Co-Kultur zeigten die Neurosphäroide signifikant höhere Anzahl an Neuriten und signifikant längere Neuriten.