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Zyklische Dehnung beeinflusst die Expression des Angiogenesefaktors VEGF und des Transkriptionsfaktors HIF-1ά in Fibroblasten
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Veröffentlicht: | 19. Oktober 2004 |
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Fragestellung
Die Neubildung von Blutgefäßen (Angiogenese) spielt eine wichtige Rolle bei Heilungs- und Umbauprozessen in Sehnengewebe. Ziel dieser Studie war den Einfluss zyklischer Dehnung auf die Expression des Angiogenesefaktors VEGF und des Transkriptionsfaktors HIF-1ά in Fibroblasten zu untersuchen.
Methoden
3T3 Fibroblasten und Achillessehnenfibroblasten der Ratte wurden in einer speziellen Zellkulturkammer intermittierend über 24 Stunden mit verschiedenen Frequenzen zyklisch gedehnt (8%, 0,5 Hz, 1 Hz). Die Expression des Angiogenesefaktors VEGF und des Transkriptionsfaktors HIF-1ά wurde mit immunhistochemischen Methoden, ELISA, Western blot und RT PCR untersucht.
Ergebnisse
Im Überstand von 3T3 Fibroblasten und Achillessehnenfibroblasten war VEGF mit dem ELISA nachweisbar. Nach zyklischer Dehnung mit 1 Hz war die VEGF Konzentration jedoch signifikant höher als in Kulturen, die nicht zyklisch gedehnt wurden. Die RT PCR Analysen zeigen, dass nur die Splicevarianten VEGF 121 und VEGF 165 exprimiert werden. Mit Western blot Analysen kann nachgewiesen werden nachweisen, dass zyklische Dehnung (1 Hz) den Transkriptionsfaktor HIF-1α aktiviert.
Schlussfolgerungen
Diese Ergebnisse zeigen erstmals, dass mechanische Reize die Expression des Angiogenesefaktors VEGF in Sehnenzellen induzieren. Weiterhin zeigen die Befunde, dass der Transcriptionsfaktor HIF-1α nicht wie bisher angenommen nur durch Hypoxie, sondern auch durch mechanische Stimuli induziert wird.